Production et purification de protéine en cellules de mammifère

La production de protéines recombinantes dans les cellules mammaliennes est une approche puissante et largement utilisée pour générer des protéines biologiquement actives avec des modifications post-traductionnelles (PTM) authentiques, essentielles à leur fonctionnement correct. Contrairement aux systèmes d’expression plus simples, les cellules mammaliennes — le plus souvent les cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) — offrent un environnement cellulaire qui imite étroitement la physiologie humaine, permettant la synthèse de protéines structurellement et fonctionnellement similaires à leurs homologues naturels.

Pourquoi les Cellules Mammaliennes ?

Les systèmes d’expression mammalienne sont préférés lorsque l’objectif est de produire des protéines nécessitant un pliage complexe et des PTM telles que la glycosylation, le clivage, la méthylation, la phosphorylation et la sulfatation. Ces modifications font partie du processus normal de maturation des protéines et influencent significativement leur stabilité, leur activité et leurs interactions. Par exemple, la glycosylation affecte le pliage des protéines et la reconnaissance immunitaire, tandis que la phosphorylation peut réguler l’activité des protéines et les voies de signalisation.

L’utilisation de cellules mammaliennes garantit que la protéine recombinante n’est pas seulement la chaîne polypeptidique codée par le gène, mais une molécule bien structurée avec l’ensemble des modifications qui définissent sa fonction biologique et ses propriétés physiques. Cela est particulièrement important pour les protéines pertinentes sur le plan biomédical, y compris les anticorps thérapeutiques, les enzymes et les protéines membranaires.

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Les Cellules CHO comme Pilier

Les cellules CHO sont la référence pour la production de protéines recombinantes depuis plus de 40 ans en raison de leur robustesse, de leur évolutivité et de leur capacité à effectuer des PTM similaires à celles des humains. Elles offrent une plateforme sûre et efficace pour produire des protéines allant de milligrammes à grammes, adaptées aux applications de recherche, de diagnostic et thérapeutiques.

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Aperçu de Notre Service

Notre service de production et de purification de protéines utilisant des cellules mammaliennes comprend :

  • Consultation et Conception de Constructions : Adaptation des constructions génétiques optimisées pour l’expression mammalienne.

  • Transfection et Expression : Utilisation de méthodes de transfection transitoire ou stable pour introduire le gène d’intérêt dans les cellules CHO, assurant une synthèse efficace des protéines.

  • Pliage des Protéines et PTM : Exploitation de la machinerie cellulaire mammalienne pour obtenir un pliage correct et des modifications post-traductionnelles similaires à celles des protéines natives.

  • Purification : Utilisation de techniques chromatographiques avancées pour isoler la protéine cible avec une pureté et une activité élevées.

  • Contrôle de Qualité : Caractérisation de l’intégrité structurelle et fonctionnelle de la protéine, y compris la vérification des PTM.

Cette approche globale garantit que le produit protéique recombinant final est biologiquement pertinent et adapté aux applications en aval telles que la biologie structurale, les essais fonctionnels, le développement de médicaments et l’utilisation thérapeutique.

Contactez notre équipe de support technique pour explorer comment nous pouvons produire vos protéines dans les cellules mammaliennes.

 

Prestations complémentaires disponibles :
=> Synthèse de gène
=> Clonage de gène
=> Production d'anticorps polyclonaux
=> Production d'anticorps monoclonaux